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大鼠三碘甲狀腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒實驗使用說明書如下：
實驗原理?
本試劑盒采用雙抗體夾心法測定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中的三碘甲狀腺原氨酸(T3)含量。首先用純化的大鼠T3抗體包被微孔板，形成固相抗體。隨后依次加入待測樣本中的T3和HRP標記的T3抗體，形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物。洗滌后加入底物TMB顯色，TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化為藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化為黃色。顏色的深淺與樣品中的T3濃度呈正相關(guān)，通過酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值)，并利用標準曲線計算樣品中T3的濃度?。
BS-3457 大鼠三碘甲狀腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒 96T/48T
試劑盒組成?
30倍濃縮洗滌液?：20ml×1瓶
酶標試劑?：6ml×1瓶
酶標包被板?：1塊(96孔)
標準品(240ng/ml)?：1瓶
顯色液A?：1瓶
顯色液B?：1瓶
終止液?：6ml×1瓶
說明書?：1份?。
實驗步驟?
樣本準備?：將大鼠血清或血漿樣本離心后取上清液，避免溶血或脂血?。
加樣?：依次向包被板孔中加入標準品、質(zhì)控品和待測樣本，每孔50μL?。
孵育?：37℃孵育30分鐘，洗滌5次?。
加酶標試劑?：每孔加入50μL HRP標記的T3抗體，37℃孵育30分鐘，洗滌5次?。
顯色?：每孔加入50μL顯色液A和50μL顯色液B，避光反應(yīng)15分鐘?。
終止反應(yīng)?：每孔加入50μL終止液，輕輕混勻?。
測定?：使用酶標儀在450nm波長下測定各孔OD值?。
結(jié)果計算?
繪制標準曲線?：以標準品濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，繪制標準曲線?。
計算樣本濃度?：根據(jù)樣本OD值，從標準曲線中查得對應(yīng)的T3濃度?。
注意事項?
試劑保存?：未開封試劑盒保存于2-8℃，開封后酶標板需密封保存于-20℃?。
操作規(guī)范?：避免交叉污染，使用一次性吸頭，洗滌?。
樣本處理?：避免反復(fù)凍融樣本，確保樣本新鮮?。
實驗環(huán)境?：保持實驗室溫度、濕度穩(wěn)定，避免強光直射?。
適用范圍?
本試劑盒適用于定量測定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中的三碘甲狀腺原氨酸(T3)含量，用于甲狀腺功能相關(guān)研究?。
技術(shù)參數(shù)?
檢測范圍?：4ng/ml-120ng/ml?。
檢測限?：47.4pg/mL?。
保質(zhì)期?：12個月?。
以上為大鼠三碘甲狀腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒的詳細使用說明，實驗操作需嚴格按照說明書進行，以確保結(jié)果的準確性和可靠性?。
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