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熒光定量PCR板用磁力架主要應(yīng)用、類型、選擇要點(diǎn)
下面本生技術(shù)小編將從它的定義、工作原理、主要應(yīng)用、類型、選擇要點(diǎn)和使用注意事項(xiàng)等方面進(jìn)行全面介紹。
一、什么是熒光定量PCR板磁力架?
熒光定量PCR板磁力架是一種專門設(shè)計(jì)用于容納和固定標(biāo)準(zhǔn)96孔PCR板(或8聯(lián)管)的裝置。其內(nèi)部嵌有精心排列的強(qiáng)力磁鐵(通常是釹鐵硼磁鐵)。當(dāng)將含有磁珠-液體混合物的PCR板放置其上時(shí)，磁力架能夠產(chǎn)生強(qiáng)大的磁場(chǎng)，將磁珠迅速吸附并固定在PCR板孔的側(cè)壁或底部，從而輕松實(shí)現(xiàn)液體與磁珠的分離。
它的設(shè)計(jì)匹配qPCR板的尺寸和孔距，確保了每個(gè)孔都能受到均勻且強(qiáng)大的磁場(chǎng)作用。
二、工作原理
其核心原理是磁分離技術(shù)：
結(jié)合：在qPCR板的每個(gè)孔中，含有目標(biāo)分子(如DNA、RNA、蛋白質(zhì))的溶液與表面覆有特定官能團(tuán)(如羧基、鏈霉親和素)的磁珠混合。目標(biāo)分子會(huì)特異性地結(jié)合到磁珠上。
吸附：將qPCR板放置到磁力架上。磁場(chǎng)在瞬間穿透板壁，作用于孔內(nèi)的磁珠。
固定：結(jié)合有目標(biāo)分子的磁珠被磁場(chǎng)吸附到孔壁一側(cè)，形成肉眼可見的磁珠團(tuán)。
清洗：此時(shí)，孔內(nèi)的液體(含有不需要的雜質(zhì)、蛋白質(zhì)、鹽離子等)變得清澈且與磁珠分離。用移液器可以輕松地吸棄上清液，而不會(huì)擾動(dòng)磁珠。
洗脫：將板從磁力架上移開，磁場(chǎng)消失。加入洗脫緩沖液(如水或TE緩沖液)并吹打混勻，目標(biāo)分子從磁珠上釋放到溶液中，最終得到純化的樣品。
三、主要應(yīng)用
qPCR板磁力架主要用于高通量、小體積的磁珠純化實(shí)驗(yàn)，常見于：
二代測(cè)序(NGS)文庫構(gòu)建：在文庫純化、大小選擇、擴(kuò)增產(chǎn)物純化等步驟中。
高通量核酸提取與純化：從96孔板培養(yǎng)的細(xì)胞或組織中快速提取基因組DNA或RNA。
PCR/qPCR產(chǎn)物純化：去除反應(yīng)體系中的引物、dNTPs、酶等雜質(zhì)，提高下游實(shí)驗(yàn)效率。
蛋白質(zhì)純化與免疫沉淀：如使用磁珠進(jìn)行高通量的Co-IP、ChIP等實(shí)驗(yàn)。
自動(dòng)化工作站：許多磁力架的設(shè)計(jì)兼容液體處理機(jī)器人，用于實(shí)現(xiàn)全自動(dòng)化的純化流程。
四、主要類型
根據(jù)磁場(chǎng)方向分類：
側(cè)吸式磁力架：磁鐵位于孔的側(cè)面，磁珠被吸附到孔的側(cè)壁上。優(yōu)點(diǎn)是吸附速度快，孔底無磁珠殘留，便于吸棄上清。這是目前最主流的類型。
底吸式磁力架：磁鐵位于孔的下方，磁珠被吸附到孔底。優(yōu)點(diǎn)是比較節(jié)省空間，但有時(shí)孔底中心會(huì)殘留少量磁珠，吸棄上清時(shí)需要特別小心以免觸及磁珠。
根據(jù)材質(zhì)分類：
金屬材質(zhì)：通常為鋁合金，堅(jiān)固耐用，散熱性好。
工程塑料材質(zhì)：重量輕，成本較低，耐腐蝕。
根據(jù)通量分類：
96孔板標(biāo)準(zhǔn)型：常用。
48孔/深孔板兼容型：有些設(shè)計(jì)可兼容多種板型。
根據(jù)是否兼容自動(dòng)化：
手動(dòng)操作型：設(shè)計(jì)簡(jiǎn)單，用于人工操作。
自動(dòng)化兼容型：具有特定的外形尺寸和底座高度，可集成到機(jī)械臂工作站中。
五、如何選擇合適的qPCR板磁力架?
磁場(chǎng)強(qiáng)度和均勻性：這是最重要的指標(biāo)。強(qiáng)大的磁場(chǎng)能確保磁珠快速(通常在1分鐘內(nèi))且地被吸附，提高實(shí)驗(yàn)效率和回收率。
吸附方式：側(cè)吸式因其優(yōu)勢(shì)已成為大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室的選擇。
板位兼容性：確保磁力架能牢固地放置您使用的qPCR板品牌，避免滑動(dòng)。
耐用性：高質(zhì)量的磁力架應(yīng)能長(zhǎng)期保持磁性不衰減，且外殼堅(jiān)固，不易損壞。
人性化設(shè)計(jì)：是否有取板凹槽、防滑腳墊、標(biāo)識(shí)清晰等。
六、使用注意事項(xiàng)
避免撞擊和高溫：強(qiáng)力磁鐵受到猛烈撞擊或長(zhǎng)期處于高溫環(huán)境(>80°C)可能會(huì)消磁。
保持清潔：及時(shí)清理灑出的液體，防止腐蝕。可用75%乙醇擦拭消毒。
遠(yuǎn)離敏感物品：強(qiáng)磁場(chǎng)會(huì)影響卡、手機(jī)、電腦硬盤、機(jī)械手表等物品，請(qǐng)妥善存放。
輕柔操作：放置和取下板子時(shí)動(dòng)作輕柔，避免板子彎曲或?yàn)R出孔內(nèi)液體。
注：以上資料僅供參考，不作為實(shí)際數(shù)據(jù)，如需具體產(chǎn)品資料請(qǐng)咨詢技術(shù)老師或品牌商。
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